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本试剂盒适用于从TAE和TBE琼脂糖凝胶中回收100bp～10kb的DNA片段，回收效率可达80%。本试剂盒采用高效、专一的吸附柱，能够选择性地吸附核酸分子，去除其他杂质，得到高质量的DNA回收产物。本试剂盒采用的膜结合液中不含有干扰酶活性的碘化钠，所得到的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、连接、转化、文库筛选等实验。

• 适用范围广，回收效率高。独特的离心柱和精心配制的缓冲液，保证可高效回收目的DNA。
  
• 操作简单快速，整个回收过程二十分钟之内即可完成。
  
• 可以回收单链、双链DNA片段以及环状质粒DNA。

• 本试剂盒于常温(15～25℃)运输，室温(15～25℃)干燥条件下，可保存12个月，更长时间的保存可置于2～8℃。
  
• 温度较低时，有的溶液可能产生沉淀，使用前在37℃水浴中加热，直至沉淀消失。

• 电泳时最好使用新的电泳缓冲液，以免影响电泳和回收效果。
  
• 如果下一步实验要求较高，应尽量使用TAE电泳缓冲液。
  
• 所有离心步骤均为使用常规台式离心机在室温下进行离心，速度为12000rpm(~13400×g)。
  
• 切胶时，紫外照射时间应尽量短，以免对DNA造成损伤。
  
• 回收<100bp及>10kb的DNA片段时，应加大溶胶液的体积，延长吸附和洗脱的时间。
  
• 回收率与初始DNA量和洗脱体积有关，初始量越少、洗脱体积越少，回收率越低。

• 将单一的目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分)，放入干净的离心管中，称取重量。
  
• 向胶块中加入3倍体积Buffer PN(如果凝胶重为0.1g，其体积可视为100μL，则加入300μL Buffer PN)，50℃水浴5～10分钟，其间不断温和地上下翻转离心管，以确保胶块充分溶解。如果还有未溶的胶块，可继续放置几分钟或再补加一些溶胶液，直至胶块完全溶解(若胶块体积过大，可事先将胶块切成碎块)。
  注意：胶块融化后溶液若由黄色变为红色，需向含DNA的胶溶液中加入5～30μL 3M醋酸钠(pH5.2)，使溶液变为黄色。胶块完全溶解后最好将溶液温度降至室温再上柱，因为吸附柱在室温时结合DNA的能力较强。
  
• (可选步骤)当目的片段<500bp时，加入所使用的Buffer PN体积1/3的异丙醇，混匀。当目的片段≥500bp时，此步可省略，直接进行步骤4。
  
• 将上一步所得溶液全部加入吸附柱，室温放置2min，12000rpm离心30 s，倒掉收集管中的液体，将吸附柱放入同一个收集管中。
  注意：吸附柱的最大有效容积为750μL，如果溶液较多，可分批加入。如果回收的DNA片段较大或浓度较低时，可将收集管中的液体再一次加入同一吸附柱中离心。此步骤可进一步提高DNA的回收效率。
  
• 向吸附柱中加入300μL Buffer PN，12000rpm离心30 s，倒掉收集管中的液体，将吸附柱放入同一个收集管中。
  
• 向吸附柱中加入500μL Buffer PW(请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心30 s，倒掉收集管中的液体，将吸附柱放入同一个收集管中。
  注意：如果回收的DNA是用于盐敏感的实验，例如平末端连接实验或直接测序，建议PW加入后静置2～5min再离心。Buffer PW中加入4倍体积无水乙醇。
  
• 重复步骤6一次。
  
• 将空吸附柱和收集管放入离心机，12000rpm离心1min，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。
  注意：漂洗液中乙醇的残留会影响后续酶反应实验。为确保下游实验免受影响，建议将吸附柱开盖，于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
  
• 将吸附柱置于一个干净的离心管中，向吸附膜中央加入30～50μL Buffer EB，室温静置2min，12000rpm离心1min。将所得到的DNA溶液置于-20℃保存或用于后续试验。
  注意：洗脱缓冲液体积不应少于30μL，体积过小影响回收效率。
  洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若后续做测序，需使用ddH2O做洗脱液，并保证其pH值在7.0～8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防止DNA降解。
  为了提高DNA的回收量，可将Buffer EB预热至60℃，并将得到的溶液重新加入吸附柱中，室温静置2min，12000rpm离心1min，将DNA溶液收集到离心管中。